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兽用中草药免疫增强剂对猪瘟疫苗免疫的研究

2012-07-21

——摘自闫益波等的研究报告

摘要:采用兽用中草药免疫增强剂联合猪瘟疫苗接种,对602月龄体重20kg仔猪进行免疫增强试验。结果表明,兽用中草药免疫增强剂显著提高了试验组猪血清中IgGIgM的含量,同时TB淋巴细胞增值率也显著提高,T淋巴细胞亚群比例(CD3+CD4+CD8+CD3+/ CD8+)也明显改善。另外,兽用中草药免疫增强剂对猪红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)含量和转氨酶没有显著影响,能显著提高抗氧化酶(SOD)活性和嗜中性粒细胞吞噬功能。试验用中草药免疫增强剂可显著增强猪瘟疫苗的免疫效果。

近年来由于长期大量滥用药物及不合理地接种疫苗,导致畜禽机体免疫功能下降的问题非常严峻,如何采用有效手段提高猪体的免疫功能,同时加强疫苗的免疫效果是一个重要的研究课题。目前,化药免疫增强剂研究领域尽管取得了较大的进展,然而都不同程度的存在着降低畜禽生产性能,引发多种疾病和药物残留危害人类健康等弊病。相比之下,中草药因具有来源广泛、价格低廉和毒副作用小等优势而备受关注。研究表明许多中草药具有提高动物免疫功能的作用,包括人参、黄芪、党参、当归和甘草等。这些中草药富含多糖、皂甙、黄酮类物质等活性成分,对机体的细胞免疫和体液免疫功能具有增强或调节作用,从而提高动物机体的抗病力。目前研究单味药物和成分的较多,复方研究较少,本项目在前期对猪瘟疫苗免疫效果的影响,以便为中草药高效免疫增强剂的推广应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物的选择与处理

供试猪选择杜长大猪60头,50~60日龄,体重相近(20±2kg),全部为未经任何疫(菌)苗免疫的健康仔猪。饲养管理上,试验组和对照组仔猪均采用统一的饲养管理、营养水平,实行专人管理、专人观察记录。

1.2 复方兽用中草药免疫增强剂的组成

主要成分是人参、黄芪、党参、茯苓、当归、白术、砂仁、陈皮、西洋参、甘草等十余味富含多糖、皂甙、黄酮类物质的中草药,中草药原料选购于太原市中药学校药材经销部。

1.3 疫苗与化学试剂

试验用猪瘟疫苗由中牧实业股份有限公司兰州生物药厂生产(生产批号:060104),冷冻保存于超低温冰箱。肝素钠、植物凝集素(PHA)、台盼蓝(TB)、细菌脂多糖(LPS)、四甲基偶氮唑盐(MTT)均为国产分析纯;淋巴细胞分离液和氢氧化铝胶分别购于中国医学科学院生物工程研究所和隆克尔生物制药有限公司。小牛血清、双抗、0.8%NH4CL溶液、瑞士染色液、营养液等均由本课题组配制。

1.4 试验设计

试验采用单因子随机区组设计,将选择好的60头仔猪随机分为4组。试验组(猪瘟疫苗接种+中草药高效免疫增强剂)45头,其中,根据中草药免疫增强剂在仔猪饲料中添加量的不同,再分为1.0%组、1.5%组和2.0%组,每组15头,对照组(单纯猪瘟疫苗接种)15头。试验全期60天,其中预试期10天,正式试验50天。在试验组和对照组猪群接种疫苗后的第10天、20天、30天和40天,分别对四组猪群各随机挑选10头猪,前腔静脉采集血样10mL,进行相关免疫细胞学指标和生化指标检测。

1.5 试验方法

猪血清中IgGIgM检测,用免疫投射比浊法;猪外周血TB淋巴细胞增值率测定,用MTT法;红细胞(RBC)和血红蛋白(Hb)含量测定,用《兽医临床诊断学》中的方法;血清GPTGOTSOD活性的测定,用全自动生化分析仪(TOSHIBATokyoJapan)T淋巴细胞亚群用流式细胞分析仪分析(Becton DickinsonRutherfordNJUSA);嗜中性粒细胞吞噬率测定,用公式计算,吞噬率=吞噬细菌的中性粒细胞/计数的中性粒细胞×100%

1.6 统计分析

试验数据均用Excel整理,数值表示为平均值±标准差,用SPSS17.0软件进行方差分析。